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透析袋說明介紹

2015-05-15      點擊:903

透析袋說明|介紹
透析隻需要使用專用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋狀,就叫做透析袋。
   自Thomas Graham1861年發明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學實驗室zui簡便zui常用的分離純化技術之一。在生物大分子的制備過程中,除鹽、除少量有機溶劑、除去生物小分子雜質和濃縮樣品等都要用到透析的技術。
  透析隻需要使用專用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋狀,将生物大分子樣品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外,直到袋内外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋内未透析出的樣品溶液稱為“保留液",袋(膜)外的溶液稱為“滲出液"或“透析液"。
  透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質在膜内外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
   透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜,目前常用的是美國Union Carbide(聯合碳化物公司)生産的各種尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量,縮寫為MwCO)通常為1萬左右。
   商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為10 mm~77mm不等。為防幹裂,出廠時都用10%的甘油處理過,并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質,它們對蛋白質和其它生物活性物質有害,用前必須除去。可先用50%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/LEDTA溶液洗滌,zui後用蒸餾水沖洗即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質特别有效。使用後的透析袋洗淨後可存于4℃蒸餾水中,若長時間不用,可加少量NaN2,以防長菌。洗淨涼幹的透析袋彎折時易裂口,用時必須仔細檢查,不漏時方可重複使用。
  新透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗淨,即可使用。使用時,一端用橡皮筋或線繩紮緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋内将袋漲破。含鹽量很高的蛋白質溶液透析隔夜時,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋内放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
   檢查透析效果的方法是:用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3檢查NaCl、KCl等。
  為了提高透析效率,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設計與制作各種簡易的透析裝置。  
 根據個人使用經驗,建議使用透析袋效果比較好,還有具體需要什麼規格的要看伱的目的蛋白量有多大,才能決定使用多大的截留分子量的透析袋,一般截留量越大價格也就會越高,還有就是透析袋寬度的選擇,要看伱的實驗一次需要透析多少量來決定。