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人外周血淋巴細胞未來發展規劃

2016-07-19      點擊:624
    人外周血淋巴細胞未來發展規劃
    人外周血淋巴細胞為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺,适用于從血液分離所需細胞,在醫療和醫學生物學研究中廣泛應用。其他人及動物多種比重細胞分離液。
    人外周血淋巴細胞因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。通常情況下人外周血淋巴細胞是沒有分裂細胞的,隻有在異常情況下才能發現。人外周血淋巴細胞中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期的非增殖狀态。體外培養時經一定劑量的植物血凝素(PHA)刺激,T淋巴細胞可轉變為淋巴母細胞,重新進入增殖周期,進行有絲分裂。
    人外周血淋巴細胞經過68-72小時(三個周期)的短期培養,即可産生大量的增殖期細胞群,用秋水仙素(細胞分裂阻斷劑)積累分裂相,可使處在分裂期的淋巴細胞停留在分裂中期或早中期,從而獲得足夠的可供分析的中期分裂相。人外周血淋巴細胞先以碘酒和75%乙醇消毒皮膚。用2ml滅菌注射器吸取約0.2ml肝素,作靜脈穿刺,抽取外周靜脈血1ml。
    人外周血淋巴細胞是體外淋巴細胞培養成敗的關鍵問題,因此,要考慮它的質量和濃度。鹽水提取物一般冰凍保存的時間不宜過長,時間長了效價減低。濃度一般用1%~2%,每毫升培養液加0.2~0.4ml;人外周血淋巴細胞濃度過高可能會導緻紅細胞凝集。培養箱的溫度應控制在37±0.5℃,溫度過高或過低均會影響細胞生長。培養基的pH值應該在7.2-7.4左右,低了細胞生長不良,高了細胞則會出現輕度的固縮。